କଞ୍ଚାମାଲ, ମଧ୍ୟସ୍ଥି, ପ୍ରସ୍ତୁତି ଏବଂ ପ୍ୟାକେଜିଂ ସାମଗ୍ରୀରେ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଉପାଦାନର ବିଷୟବସ୍ତୁ ଏବଂ ଅପରିଷ୍କାରତା ପରୀକ୍ଷା କରିବା ପାଇଁ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ହେଉଛି ମୁଖ୍ୟ ପଦ୍ଧତି, କିନ୍ତୁ ଅନେକ ପଦାର୍ଥ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରିବାକୁ ମାନକ ପଦ୍ଧତି ନାହିଁ, ତେଣୁ ନୂତନ ପଦ୍ଧତି ବିକାଶ କରିବା ଅପରିହାର୍ଯ୍ୟ | ତରଳ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ପଦ୍ଧତିଗୁଡିକର ବିକାଶରେ, କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ହେଉଛି ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିର ମୂଳ, ତେଣୁ ଏକ ଉପଯୁକ୍ତ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ସ୍ତମ୍ଭ କିପରି ବାଛିବେ ତାହା ଅତ୍ୟନ୍ତ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ | ଏହି ଆର୍ଟିକିଲରେ, ଲେଖକ ତିନୋଟି ଦିଗରୁ କିପରି ଏକ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭ ବାଛିବେ ତାହା ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରିବେ: ସାମଗ୍ରିକ ଧାରଣା, ବିଚାର ଏବଂ ପ୍ରୟୋଗ ପରିସର |
ଉ: ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭ ବାଛିବା ପାଇଁ ସମସ୍ତ ଧାରଣା |
ବିଶ୍ଳେଷଣର ଶାରୀରିକ ଏବଂ ରାସାୟନିକ ଗୁଣଗୁଡିକର ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କର: ଯେପରିକି ରାସାୟନିକ ଗଠନ, ଦ୍ରବଣ, ସ୍ଥିରତା (ଯେପରିକି ଅକ୍ସିଡାଇଜ୍ / ହ୍ରାସ / ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜେଡ୍ ହେବା ସହଜ କି ନୁହେଁ), ଅମ୍ଳତା ଏବଂ କ୍ଷାରୀୟତା ଇତ୍ୟାଦି, ବିଶେଷତ the ରାସାୟନିକ ଗଠନ ହେଉଛି ମୁଖ୍ୟ | ଗୁଣ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବାରେ କାରକ, ଯେପରିକି କଞ୍ଜୁଗେଟେଡ୍ ଗୋଷ୍ଠୀର ଶକ୍ତିଶାଳୀ ଅଲଟ୍ରାଭାଇଓଲେଟ୍ ଅବଶୋଷଣ ଏବଂ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ଅଛି;
ବିଶ୍ଳେଷଣର ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କର: ଉଚ୍ଚ ପୃଥକତା, ଉଚ୍ଚ ସ୍ତମ୍ଭ ଦକ୍ଷତା, ସ୍ୱଳ୍ପ ବିଶ୍ଳେଷଣ ସମୟ, ଉଚ୍ଚ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା, ଉଚ୍ଚ ଚାପ ପ୍ରତିରୋଧ, ଦୀର୍ଘ ସ୍ତମ୍ଭ ଜୀବନ, ସ୍ୱଳ୍ପ ମୂଲ୍ୟ ଇତ୍ୟାଦି ଆବଶ୍ୟକ କି ନୁହେଁ;
- ଏକ ଉପଯୁକ୍ତ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ବାଛନ୍ତୁ: କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ଫିଲରର ରଚନା, ଶାରୀରିକ ଏବଂ ରାସାୟନିକ ଗୁଣ ବୁ understand ନ୍ତୁ, ଯେପରିକି କଣିକାର ଆକାର, ଖୋଲା ଆକାର, ତାପମାତ୍ରା ସହନଶୀଳତା, pH ସହନଶୀଳତା, ବିଶ୍ଳେଷଣର ଆଡର୍ସପସନ୍ ଇତ୍ୟାଦି |
- ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭ ବାଛିବା ପାଇଁ ବିଚାର |
କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭର ଭ physical ତିକ ଏବଂ ରାସାୟନିକ ଗୁଣର ଦୃଷ୍ଟିକୋଣରୁ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭ ବାଛିବାବେଳେ ଏହି ଅଧ୍ୟାୟଟି ବିଚାର କରିବାକୁ ହେବ | 2.1 ଫିଲର୍ ମ୍ୟାଟ୍ରିକ୍ସ |
2.1.1 ସିଲିକା ଜେଲ୍ ମ୍ୟାଟ୍ରିକ୍ସ ଅଧିକାଂଶ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭର ଫିଲର୍ ମ୍ୟାଟ୍ରିକ୍ସ ହେଉଛି ସିଲିକା ଜେଲ୍ | ଏହି ପ୍ରକାରର ଫିଲରର ଉଚ୍ଚ ଶୁଦ୍ଧତା, ସ୍ୱଳ୍ପ ମୂଲ୍ୟ, ଉଚ୍ଚ ଯାନ୍ତ୍ରିକ ଶକ୍ତି ଅଛି, ଏବଂ ଗୋଷ୍ଠୀକୁ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରିବା ସହଜ ଅଟେ (ଯେପରିକି ଫେନିଲ୍ ବଣ୍ଡିଂ, ଆମିନୋ ବଣ୍ଡିଂ, ସିଆନୋ ବଣ୍ଡିଂ ଇତ୍ୟାଦି), କିନ୍ତୁ pH ମୂଲ୍ୟ ଏବଂ ତାପମାତ୍ରା ସୀମା ଏହାକୁ ସହ୍ୟ କରେ: ଅଧିକାଂଶ ସିଲିକା ଜେଲ୍ ମ୍ୟାଟ୍ରିକ୍ସ ଫିଲରଗୁଡିକର pH ପରିସର 2 ରୁ 8 ଅଟେ, କିନ୍ତୁ ସ୍ modified ତନ୍ତ୍ର ରୂପାନ୍ତରିତ ସିଲିକା ଜେଲ୍ ବଣ୍ଡେଡ୍ ପର୍ଯ୍ୟାୟର pH ପରିସର 1.5 ରୁ 10 ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଚଉଡା ହୋଇପାରେ, ଏବଂ ସେଠାରେ ସ୍ modified ତନ୍ତ୍ର ରୂପାନ୍ତରିତ ସିଲିକା ଜେଲ୍ ବଣ୍ଡେଡ୍ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ମଧ୍ୟ ସ୍ଥିର ଅଛି | ନିମ୍ନ pH, ଯେପରିକି Agilent ZORBAX RRHD stabilbond-C18, ଯାହା pH 1 ରୁ 8 ରେ ସ୍ଥିର ଅଟେ; ସିଲିକା ଜେଲ୍ ମ୍ୟାଟ୍ରିକ୍ସର ଉପର ତାପମାତ୍ରା ସୀମା ସାଧାରଣତ 60 60 is ଅଟେ, ଏବଂ କେତେକ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭ ଉଚ୍ଚ pH ରେ 40 a ତାପମାତ୍ରାକୁ ସହ୍ୟ କରିପାରନ୍ତି |
2.1.2 ପଲିମର ମ୍ୟାଟ୍ରିକ୍ସ ପଲିମର ଫିଲରଗୁଡିକ ମୁଖ୍ୟତ pol ପଲିଷ୍ଟାଇରନ୍-ଡିଭିନିଲବେଞ୍ଜେନ୍ କିମ୍ବା ପଲିମେଥାକ୍ରିଲେଟ୍ | ସେମାନଙ୍କର ସୁବିଧା ହେଉଛି ଯେ ସେମାନେ ଏକ ବ୍ୟାପକ pH ପରିସରକୁ ସହ୍ୟ କରିପାରିବେ - ସେଗୁଡିକ 1 ରୁ 14 ପରିସର ମଧ୍ୟରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ ଏବଂ ସେମାନେ ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରାକୁ ଅଧିକ ପ୍ରତିରୋଧ କରନ୍ତି (80 ° C ରୁ ଅଧିକ ହୋଇପାରେ) | ସିଲିକା-ଆଧାରିତ C18 ଫିଲର୍ ସହିତ ତୁଳନା କଲେ ଏହି ପ୍ରକାରର ଫିଲରର ଶକ୍ତିଶାଳୀ ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିସିଟି ଥାଏ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍ ପରି ନମୁନାକୁ ପୃଥକ କରିବାରେ ମାକ୍ରୋପୋରସ୍ ପଲିମର ବହୁତ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ | ଏହାର ଅସୁବିଧା ହେଉଛି ସ୍ତମ୍ଭର ଦକ୍ଷତା କମ୍ ଏବଂ ସିଲିକା-ଆଧାରିତ ଫିଲର ତୁଳନାରେ ଯାନ୍ତ୍ରିକ ଶକ୍ତି ଦୁର୍ବଳ | 2.2 କଣିକା ଆକୃତି |
ଅଧିକାଂଶ ଆଧୁନିକ HPLC ଫିଲରଗୁଡିକ ଗୋଲାକାର କଣିକା, କିନ୍ତୁ ବେଳେବେଳେ ସେଗୁଡ଼ିକ ଅନିୟମିତ କଣିକା | ଗୋଲାକାର କଣିକା ନିମ୍ନ ସ୍ତମ୍ଭ ଚାପ, ଉଚ୍ଚ ସ୍ତମ୍ଭ ଦକ୍ଷତା, ସ୍ଥିରତା ଏବଂ ଦୀର୍ଘ ଜୀବନ ପ୍ରଦାନ କରିପାରିବ; ଉଚ୍ଚ ସାନ୍ଦ୍ରତା ମୋବାଇଲ୍ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ବ୍ୟବହାର କରିବାବେଳେ (ଯେପରିକି ଫସଫୋରିକ୍ ଏସିଡ୍) କିମ୍ବା ଯେତେବେଳେ ନମୁନା ସମାଧାନ ଭିଜକସ୍ ହୁଏ, ଅନିୟମିତ କଣିକାର ଏକ ବୃହତ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପୃଷ୍ଠଭୂମି ଅଛି, ଯାହା ଦୁଇଟି ପର୍ଯ୍ୟାୟର ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ କାର୍ଯ୍ୟ ପାଇଁ ଅଧିକ ଅନୁକୂଳ ଅଟେ ଏବଂ ମୂଲ୍ୟ ଅପେକ୍ଷାକୃତ କମ୍ ଅଟେ | 2.3 କଣିକା ଆକାର |
କଣିକାର ଆକାର ଯେତେ ଛୋଟ, ସ୍ତମ୍ଭର ଦକ୍ଷତା ଏବଂ ପୃଥକତା ଅଧିକ, କିନ୍ତୁ ଉଚ୍ଚ ଚାପ ପ୍ରତିରୋଧ ଅଧିକ ଖରାପ | ସାଧାରଣତ used ବ୍ୟବହୃତ ସ୍ତମ୍ଭ ହେଉଛି 5 μm କଣିକା ଆକାର ସ୍ତମ୍ଭ; ଯଦି ପୃଥକତା ଆବଶ୍ୟକତା ଅଧିକ, 1.5-3 μm ଫିଲର ଚୟନ କରାଯାଇପାରିବ, ଯାହା କିଛି ଜଟିଳ ମ୍ୟାଟ୍ରିକ୍ସ ଏବଂ ମଲ୍ଟି-କମ୍ପୋନେଣ୍ଟ ନମୁନାଗୁଡିକର ପୃଥକତା ସମସ୍ୟାର ସମାଧାନ ପାଇଁ ସହାୟକ ହେବ | UPLC 1.5 μm ଫିଲର୍ ବ୍ୟବହାର କରିପାରିବ; 10 μm କିମ୍ବା ବୃହତ କଣିକା ଆକାର ଫିଲରଗୁଡିକ ପ୍ରାୟତ semi ଅର୍ଦ୍ଧ-ପ୍ରସ୍ତୁତି କିମ୍ବା ପ୍ରସ୍ତୁତି ସ୍ତମ୍ଭ ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ | 2.4 କାର୍ବନ୍ ବିଷୟବସ୍ତୁ |
କାର୍ବନ ବିଷୟବସ୍ତୁ ସିଲିକା ଜେଲର ପୃଷ୍ଠରେ ବନ୍ଧିତ ପର୍ଯ୍ୟାୟର ଅନୁପାତକୁ ବୁ refers ାଏ, ଯାହା ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଭୂପୃଷ୍ଠ ଏବଂ ବନ୍ଧିତ ପର୍ଯ୍ୟାୟ କଭରେଜ୍ ସହିତ ଜଡିତ | ଉଚ୍ଚ ଅଙ୍ଗାରକାମ୍ଳ ବିଷୟବସ୍ତୁ ଉଚ୍ଚ ସ୍ତମ୍ଭ କ୍ଷମତା ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ରେଜୋଲୁସନ ପ୍ରଦାନ କରେ, ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ଜଟିଳତା ଆବଶ୍ୟକ କରୁଥିବା ଜଟିଳ ନମୁନା ପାଇଁ ପ୍ରାୟତ used ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ, କିନ୍ତୁ ଦୁଇଟି ପର୍ଯ୍ୟାୟ ମଧ୍ୟରେ ଦୀର୍ଘ ପାରସ୍ପରିକ ସମୟ ହେତୁ ବିଶ୍ଳେଷଣ ସମୟ ଲମ୍ବା ଅଟେ | ନିମ୍ନ ଅଙ୍ଗାରକାମ୍ଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡିକର ଏକ ଛୋଟ ବିଶ୍ଳେଷଣ ସମୟ ଅଛି ଏବଂ ବିଭିନ୍ନ ଚୟନକର୍ତ୍ତା ପ୍ରଦର୍ଶନ କରିପାରିବ, ଏବଂ ପ୍ରାୟତ simple ସରଳ ନମୁନା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ ଯାହା ଶୀଘ୍ର ବିଶ୍ଳେଷଣ ଏବଂ ନମୁନା ଆବଶ୍ୟକ କରେ ଯାହା ଉଚ୍ଚ ଜଳୀୟ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଅବସ୍ଥା ଆବଶ୍ୟକ କରେ | ସାଧାରଣତ ,, C18 ର ଅଙ୍ଗାରକାମ୍ଳ 7% ରୁ 19% ମଧ୍ୟରେ ରହିଥାଏ | 2.5 ପୋର ଆକାର ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପୃଷ୍ଠଭୂମି |
HPLC ଆଡସର୍ପସନ୍ ମିଡିଆ ହେଉଛି ଖଣ୍ଡିଆ କଣିକା, ଏବଂ ଅଧିକାଂଶ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଖାଲରେ ହୋଇଥାଏ | ତେଣୁ, ଅଣୁଗୁଡ଼ିକ ବିଜ୍ଞାପନ ଏବଂ ପୃଥକ ହେବା ପାଇଁ ଖାଲରେ ପ୍ରବେଶ କରିବା ଜରୁରୀ |
ଖୋଲା ଆକାର ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପୃଷ୍ଠଭୂମି ହେଉଛି ଦୁଇଟି ସଂପନ୍ନ ଧାରଣା | ଛୋଟ ଖୋଲା ଆକାରର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ବୃହତ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପୃଷ୍ଠଭୂମି, ଏବଂ ଏହାର ବିପରୀତ | ଏକ ବୃହତ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଭୂପୃଷ୍ଠ କ୍ଷେତ୍ର ନମୁନା ଅଣୁ ଏବଂ ବନ୍ଧିତ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ମଧ୍ୟରେ ପାରସ୍ପରିକ ସମ୍ପର୍କକୁ ବ increase ାଇପାରେ, ଧାରଣକୁ ବ enhance ାଇଥାଏ, ନମୁନା ଲୋଡିଂ ଏବଂ ସ୍ତମ୍ଭ କ୍ଷମତା ଏବଂ ଜଟିଳ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକର ପୃଥକତାକୁ ବ increase ାଇପାରେ | ସମ୍ପୁର୍ଣ୍ଣ ଖଣ୍ଡିଆ ଫିଲରଗୁଡିକ ଏହି ପ୍ରକାରର ଫିଲରଗୁଡିକର ଅଟେ | ଉଚ୍ଚ ପୃଥକତା ଆବଶ୍ୟକତା ଥିବା ବ୍ୟକ୍ତିଙ୍କ ପାଇଁ, ବୃହତ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପୃଷ୍ଠଭୂମି ସହିତ ଫିଲର୍ ବାଛିବା ପାଇଁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି | ଛୋଟ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପୃଷ୍ଠଭୂମି ପୃଷ୍ଠଭୂମି ଚାପକୁ ହ୍ରାସ କରିପାରିବ, ସ୍ତମ୍ଭର ଦକ୍ଷତାକୁ ଉନ୍ନତ କରିପାରିବ ଏବଂ ସନ୍ତୁଳନ ସମୟକୁ ହ୍ରାସ କରିପାରିବ, ଯାହା ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ଉପଯୁକ୍ତ | କୋର-ସେଲ ଫିଲରଗୁଡିକ ଏହି ପ୍ରକାରର ଫିଲରଗୁଡିକର ଅଟେ | ପୃଥକତାକୁ ସୁନିଶ୍ଚିତ କରିବା ପରିପ୍ରେକ୍ଷୀରେ, ଉଚ୍ଚ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଦକ୍ଷତା ଆବଶ୍ୟକତା ଥିବା ବ୍ୟକ୍ତିଙ୍କ ପାଇଁ ଛୋଟ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପୃଷ୍ଠଭୂମି ସହିତ ଫିଲର୍ ବାଛିବା ପାଇଁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି | 2.6 ଘୋର ଭଲ୍ୟୁମ୍ ଏବଂ ଯାନ୍ତ୍ରିକ ଶକ୍ତି |
ଖୋଲା ଭଲ୍ୟୁମ୍, ଯାହାକୁ “ପୋର ଭଲ୍ୟୁମ୍” ମଧ୍ୟ କୁହାଯାଏ, ୟୁନିଟ୍ କଣିକା ପ୍ରତି ଶୂନ୍ୟ ଭଲ୍ୟୁମର ଆକାରକୁ ସୂଚିତ କରେ | ଏହା ଫିଲରର ଯାନ୍ତ୍ରିକ ଶକ୍ତିକୁ ଭଲ ଭାବରେ ପ୍ରତିଫଳିତ କରିପାରିବ | ବଡ଼ ପୋର ଭଲ୍ୟୁମ୍ ସହିତ ଫିଲରର ଯାନ୍ତ୍ରିକ ଶକ୍ତି ଛୋଟ ପୋର ଭଲ୍ୟୁମ୍ ଥିବା ଫିଲର୍ ଅପେକ୍ଷା ଟିକିଏ ଦୁର୍ବଳ | ପୋର ଭଲ୍ୟୁମ୍ ସହିତ 1.5 ମିଲି / g ରୁ କମ୍ କିମ୍ବା ସମାନ ଥିବା ଫିଲର୍ ଗୁଡିକ ପ୍ରାୟତ H HPLC ବିଚ୍ଛିନ୍ନତା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହେଉଥିବାବେଳେ ପୋର ଭଲ୍ୟୁମ୍ ସହିତ 1.5 ମି.ଲି. 2.7 କ୍ୟାପିଂ ହାର
କ୍ୟାପିଙ୍ଗ୍ ଯ ounds ଗିକ ଏବଂ ଉନ୍ମୋଚିତ ସିଲାନୋଲ୍ ଗୋଷ୍ଠୀ ମଧ୍ୟରେ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଦ୍ caused ାରା ସୃଷ୍ଟି ହୋଇଥିବା ଟେଲିଙ୍ଗ୍ ଶିଖରକୁ ହ୍ରାସ କରିପାରିବ (ଯେପରିକି କ୍ଷାରୀୟ ଯ ounds ଗିକ ଏବଂ ସିଲାନଲ୍ ଗୋଷ୍ଠୀ ମଧ୍ୟରେ ଆୟନିକ୍ ବନ୍ଧନ, ଭ୍ୟାନ୍ ଡେର୍ ୱାଲ୍ସ ଫୋର୍ସ ଏବଂ ଅମ୍ଳୀୟ ଯ ounds ଗିକ ଏବଂ ସିଲାନୋଲ୍ ଗୋଷ୍ଠୀ ମଧ୍ୟରେ ହାଇଡ୍ରୋଜେନ୍ ବଣ୍ଡ), ଯାହା ଦ୍ column ାରା ସ୍ତମ୍ଭର ଦକ୍ଷତା ଏବଂ ଶିଖର ଆକାରରେ ଉନ୍ନତି ଘଟିବ | । ଅନାବୃତ ବନ୍ଧିତ ପର୍ଯ୍ୟାୟଗୁଡିକ କ୍ୟାପେଡ୍ ବଣ୍ଡେଡ୍ ପର୍ଯ୍ୟାୟଗୁଡ଼ିକ ସହିତ ଭିନ୍ନ ଭିନ୍ନ ଚୟନକର୍ତ୍ତା ଉତ୍ପାଦନ କରିବ, ବିଶେଷତ pol ପୋଲାର ନମୁନା ପାଇଁ |
- ବିଭିନ୍ନ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭର ପ୍ରୟୋଗ ପରିସର |
ଏହି ଅଧ୍ୟାୟଟି ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରକାରର ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭର ପ୍ରୟୋଗ ପରିସରକୁ ବର୍ଣ୍ଣନା କରିବ |
3.1 ଓଲଟା-ପର୍ଯ୍ୟାୟ C18 କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ସ୍ତମ୍ଭ |
C18 ସ୍ତମ୍ଭ ହେଉଛି ସାଧାରଣତ used ବ୍ୟବହୃତ ଓଲଟା ପର୍ଯ୍ୟାୟ ସ୍ତମ୍ଭ, ଯାହା ଅଧିକାଂଶ ଜ organic ବ ପଦାର୍ଥର ବିଷୟବସ୍ତୁ ଏବଂ ଅପରିଷ୍କାର ପରୀକ୍ଷଣକୁ ପୂରଣ କରିପାରିବ ଏବଂ ମଧ୍ୟମ-ପୋଲାର, ଦୁର୍ବଳ ପୋଲାର ଏବଂ ଅଣ-ପୋଲାର ପଦାର୍ଥ ପାଇଁ ପ୍ରଯୁଜ୍ୟ | ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପୃଥକ ଆବଶ୍ୟକତା ଅନୁଯାୟୀ C18 କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ସ୍ତମ୍ଭର ପ୍ରକାର ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ ଚୟନ କରାଯିବା ଉଚିତ | ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ଉଚ୍ଚ ପୃଥକତା ଆବଶ୍ୟକତା ଥିବା ପଦାର୍ଥଗୁଡିକ ପାଇଁ, 5 μm * 4.6 mm * 250 mm ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ପ୍ରାୟତ used ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ | ଜଟିଳ ପୃଥକ ପୃଥକ ମେଟ୍ରିକ୍ସ ଏବଂ ସମାନ ପୋଲାରିଟି ସହିତ ପଦାର୍ଥ ପାଇଁ, 4 μm * 4.6 mm * 250 mm ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା କିମ୍ବା ଛୋଟ କଣିକା ଆକାର ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ | ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ଲେଖକ ସେଲକକ୍ସିବ API ରେ ଦୁଇଟି ଜେନୋଟକ୍ସିକ୍ ଅପରିଷ୍କାର ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ 3 μm * 4.6 mm * 250 mm ସ୍ତମ୍ଭ ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲେ | ଦୁଇଟି ପଦାର୍ଥର ପୃଥକତା 2.9 ରେ ପହଞ୍ଚିପାରେ, ଯାହା ଉତ୍କୃଷ୍ଟ ଅଟେ | ଏହା ସହିତ, ପୃଥକତାକୁ ସୁନିଶ୍ଚିତ କରିବା ଅଧୀନରେ, ଯଦି ଶୀଘ୍ର ବିଶ୍ଳେଷଣ ଆବଶ୍ୟକ ହୁଏ, 10 ମିଲିମିଟର କିମ୍ବା 15 ମିଲିମିଟରର ଏକ କ୍ଷୁଦ୍ର ସ୍ତମ୍ଭ ଚୟନ କରାଯାଏ | ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ଯେତେବେଳେ ଲେଖକ ପାଇପରାକାଇନ୍ ଫସଫେଟ୍ API ରେ ଜେନୋଟକ୍ସିକ୍ ଅପରିଷ୍କାରତା ଚିହ୍ନଟ କରିବାକୁ LC-MS / MS ବ୍ୟବହାର କଲେ, 3 μm * 2.1 mm * 100 mm ସ୍ତମ୍ଭ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା | ଅପରିଷ୍କାର ଏବଂ ମୁଖ୍ୟ ଉପାଦାନ ମଧ୍ୟରେ ପୃଥକତା 2.0 ଥିଲା, ଏବଂ ଏକ ନମୁନା ଚିହ୍ନଟ 5 ମିନିଟରେ ସମାପ୍ତ ହୋଇପାରିବ | 3.2 ଓଲଟା-ଫେଜ୍ ଫେନିଲ୍ ସ୍ତମ୍ଭ |
ଫେନିଲ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ମଧ୍ୟ ଏକ ପ୍ରକାର ଓଲଟା ପର୍ଯ୍ୟାୟ ସ୍ତମ୍ଭ | ଏହି ପ୍ରକାର ସ୍ତମ୍ଭର ସୁଗନ୍ଧିତ ଯ ounds ଗିକ ପାଇଁ ଦୃ strong ଚୟନକର୍ତ୍ତା ଥାଏ | ସାଧାରଣ C18 ସ୍ତମ୍ଭ ଦ୍ୱାରା ମାପ କରାଯାଉଥିବା ସୁଗନ୍ଧିତ ଯ ounds ଗିକର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଯଦି ଦୁର୍ବଳ, ତେବେ ଆପଣ ଫେନିଲ୍ ସ୍ତମ୍ଭକୁ ବଦଳାଇବାକୁ ଚିନ୍ତା କରିପାରିବେ | ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ଯେତେବେଳେ ମୁଁ ସେଲକକ୍ସିବ୍ API ତିଆରି କରୁଥିଲି, ସମାନ ଉପାଦାନର ଫେନିଲ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ଦ୍ୱାରା ମାପ କରାଯାଉଥିବା ମୁଖ୍ୟ ଉପାଦାନ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଏବଂ ସମାନ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ (ସମସ୍ତ 5 μm * 4.6 mm * 250 mm) C18 ସ୍ତମ୍ଭର ପ୍ରାୟ 7 ଗୁଣ ଥିଲା | 3.3 ସାଧାରଣ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ସ୍ତମ୍ଭ |
ଓଲଟା ପର୍ଯ୍ୟାୟ ସ୍ତମ୍ଭ ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟ ଭାବରେ, ସାଧାରଣ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ସ୍ତମ୍ଭ ଅତ୍ୟଧିକ ପୋଲାର ଯ ounds ଗିକ ପାଇଁ ଉପଯୁକ୍ତ | ରିଭର୍ସ-ଫେଜ୍ ସ୍ତମ୍ଭରେ 90% ରୁ ଅଧିକ ଜଳୀୟ ଚରଣ ସହିତ ବ uting ଼ିବାବେଳେ ଯଦି ଶିଖରଟି ଅତ୍ୟନ୍ତ ଦ୍ରୁତ ଅଟେ, ଏବଂ ଦ୍ରବଣକାରୀ ଶିଖର ସହିତ ପାଖାପାଖି ଏବଂ ଓଭରଲେପ୍ ହୁଏ, ତେବେ ଆପଣ ସାଧାରଣ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ସ୍ତମ୍ଭକୁ ବଦଳାଇବାକୁ ଚିନ୍ତା କରିପାରିବେ | ଏହି ପ୍ରକାର ସ୍ତମ୍ଭରେ ହିଲିକ୍ ସ୍ତମ୍ଭ, ଆମିନୋ ସ୍ତମ୍ଭ, ସିଆନୋ ସ୍ତମ୍ଭ ଇତ୍ୟାଦି ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ |
3.3.1 ହିଲିକ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ହିଲିକ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ସାଧାରଣତ hyd ପୋଲାର ପଦାର୍ଥଗୁଡିକର ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ବ to ାଇବା ପାଇଁ ବନ୍ଧା ହୋଇଥିବା ଆଲ୍କାଇଲ୍ ଶୃଙ୍ଖଳରେ ହାଇଡ୍ରୋଫିଲିକ୍ ଗୋଷ୍ଠୀଗୁଡ଼ିକୁ ଧାରଣ କରିଥାଏ | ଚିନି ପଦାର୍ଥର ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ଏହି ପ୍ରକାର ସ୍ତମ୍ଭ ଉପଯୁକ୍ତ | ଜାଇଲୋସର ବିଷୟବସ୍ତୁ ଏବଂ ଆନୁସଙ୍ଗିକ ପଦାର୍ଥ ଏବଂ ଏହାର ଉତ୍ପାଦକ କରିବାବେଳେ ଲେଖକ ଏହି ପ୍ରକାର ସ୍ତମ୍ଭ ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲେ | ଏକ ଜାଇଲୋଜ୍ ଡେରିଭେଟିଭ୍ ର ଆଇସୋମର୍ ଗୁଡିକ ମଧ୍ୟ ଭଲ ଭାବରେ ପୃଥକ ହୋଇପାରେ |
3.3.2 ଆମିନୋ ସ୍ତମ୍ଭ ଏବଂ ସିଆନୋ ସ୍ତମ୍ଭ ଆମିନୋ ସ୍ତମ୍ଭ ଏବଂ ସିଆନୋ ସ୍ତମ୍ଭ, ବଣ୍ଡେଡ୍ ଆଲ୍କାଇଲ୍ ଶୃଙ୍ଖଳାର ଶେଷରେ ଯଥାକ୍ରମେ ଆମିନୋ ଏବଂ ସିଆନୋ ରୂପାନ୍ତରର ପରିଚୟକୁ ଦର୍ଶାଏ, ବିଶେଷ ପଦାର୍ଥଗୁଡ଼ିକର ଚୟନରେ ଉନ୍ନତି ଆଣିବା ପାଇଁ: ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ଆମିନୋ ସ୍ତମ୍ଭ ଏକ ଭଲ ପସନ୍ଦ | ଶର୍କରା, ଆମିନୋ ଏସିଡ୍, ବେସ୍, ଏବଂ ଆମାଇଡ୍ ପୃଥକ କରିବା ପାଇଁ; କଞ୍ଜୁଗେଟେଡ୍ ବଣ୍ଡର ଉପସ୍ଥିତି ହେତୁ ହାଇଡ୍ରୋଜେନେଟେଡ୍ ଏବଂ ଅଣହାଇଡ୍ରୋଜେନେଟେଡ୍ ଷ୍ଟ୍ରକଚରାଲ୍ ସମାନ ପଦାର୍ଥକୁ ପୃଥକ କରିବା ସମୟରେ ସିଆନୋ ସ୍ତମ୍ଭର ଉତ୍ତମ ଚୟନକର୍ତ୍ତା ଥାଏ | ଆମିନୋ ସ୍ତମ୍ଭ ଏବଂ ସିଆନୋ ସ୍ତମ୍ଭ ସାଧାରଣ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ସ୍ତମ୍ଭ ଏବଂ ଓଲଟା ପର୍ଯ୍ୟାୟ ସ୍ତମ୍ଭ ମଧ୍ୟରେ ସୁଇଚ୍ ହୋଇପାରେ, କିନ୍ତୁ ବାରମ୍ବାର ସୁଇଚ୍ କରିବା ସୁପାରିଶ କରାଯାଏ ନାହିଁ | 4.4 ଚିରାଲ୍ ସ୍ତମ୍ଭ |
ଚିରାଲ୍ ସ୍ତମ୍ଭ, ଯେପରି ନାମ ସୂଚିତ କରେ, ଚିରାଲ୍ ଯ ounds ଗିକର ପୃଥକତା ଏବଂ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ବିଶେଷ ଭାବରେ ଫାର୍ମାସ୍ୟୁଟିକାଲ୍ସ କ୍ଷେତ୍ରରେ ଉପଯୁକ୍ତ | ଏହି ପ୍ରକାରର ସ୍ତମ୍ଭକୁ ବିଚାର କରାଯାଇପାରେ ଯେତେବେଳେ ପାରମ୍ପାରିକ ଓଲଟା ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଏବଂ ସାଧାରଣ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡିକ ଆଇସୋମରର ପୃଥକତା ହାସଲ କରିପାରିବ ନାହିଁ | ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ଲେଖକ 1,2-ଡିଫେନିଲେଥାଇଲେନେଡିଏମାଇନ୍ ର ଦୁଇଟି ଆଇସୋମର୍ ଅଲଗା କରିବା ପାଇଁ 5 μm * 4.6 mm * 250 mm ଚିରାଲ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲେ: (1S, 2S) -1, 2-diphenylethylenediamine ଏବଂ (1R, 2R) -1, 2 -ଡିଫେନିଲେଥାଇଲେନେଡିଏମାଇନ୍, ଏବଂ ଉଭୟଙ୍କ ମଧ୍ୟରେ ପୃଥକତା ପ୍ରାୟ 2.0 ରେ ପହଞ୍ଚିଥିଲା | ତଥାପି, ଚିରାଲ୍ ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡିକ ଅନ୍ୟ ପ୍ରକାରର ସ୍ତମ୍ଭ ଅପେକ୍ଷା ମହଙ୍ଗା, ସାଧାରଣତ 1 1W + / ଖଣ୍ଡ | ଯଦି ଏପରି ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡ଼ିକର ଆବଶ୍ୟକତା ଅଛି, ତେବେ ୟୁନିଟ୍ ଯଥେଷ୍ଟ ବଜେଟ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରିବା ଆବଶ୍ୟକ କରେ | 3.5 ଆଇନ୍ ବିନିମୟ ସ୍ତମ୍ଭ |
ଆୟନ ବିନିମୟ ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡିକ ଚାର୍ଜ ହୋଇଥିବା ଆୟନଗୁଡିକର ପୃଥକତା ଏବଂ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ଉପଯୁକ୍ତ, ଯେପରିକି ଆୟନ, ପ୍ରୋଟିନ୍, ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଏବଂ କିଛି ଚିନି ପଦାର୍ଥ | ଫିଲର୍ ପ୍ରକାର ଅନୁଯାୟୀ, ସେଗୁଡିକ କ୍ୟାସନ୍ ଏକ୍ସଚେଞ୍ଜ୍ ସ୍ତମ୍ଭ, ଆୟନ ଏକ୍ସଚେଞ୍ଜ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ଏବଂ ଶକ୍ତିଶାଳୀ କ୍ୟାସନ୍ ଏକ୍ସଚେଞ୍ଜ୍ ସ୍ତମ୍ଭରେ ବିଭକ୍ତ |
କ୍ୟାସନ୍ ଏକ୍ସଚେଞ୍ଜ୍ ସ୍ତମ୍ଭରେ କ୍ୟାଲସିୟମ୍-ଆଧାରିତ ଏବଂ ହାଇଡ୍ରୋଜେନ୍-ଆଧାରିତ ସ୍ତମ୍ଭ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ, ଯାହା ମୁଖ୍ୟତ c ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ ପରି କ୍ୟାଟେନିକ୍ ପଦାର୍ଥର ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ଉପଯୁକ୍ତ | ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ଲେଖକ ଏକ ଫ୍ଲାଶିଙ୍ଗ୍ ସଲ୍ୟୁସନ୍ରେ କ୍ୟାଲସିୟମ୍ ଗ୍ଲୁକୋନାଟ୍ ଏବଂ କ୍ୟାଲସିୟମ୍ ଆସେଟେଟ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରିବା ସମୟରେ କ୍ୟାଲସିୟମ୍ ଆଧାରିତ ସ୍ତମ୍ଭ ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲେ | ଉଭୟ ପଦାର୍ଥର λ = 210nm ରେ ଦୃ strong ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଥିଲା, ଏବଂ ପୃଥକତା ଡିଗ୍ରୀ 3.0 ରେ ପହଞ୍ଚିଥିଲା; ଗ୍ଲୁକୋଜ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ପଦାର୍ଥ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରିବାବେଳେ ଲେଖକ ହାଇଡ୍ରୋଜେନ-ଆଧାରିତ ସ୍ତମ୍ଭ ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲେ | ଅନେକ ପ୍ରମୁଖ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ପଦାର୍ଥ - ମାଲ୍ଟୋଜ୍, ମାଲ୍ଟୋଟ୍ରିଓଜ୍ ଏବଂ ଫ୍ରୁକଟୋଜ - ଡିଫେରିଏଲ୍ ଡିଟେକ୍ଟରଗୁଡିକରେ ଉଚ୍ଚ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ଥିଲା, ଯାହାର ଚିହ୍ନଟ ସୀମା 0.5 ppm ଏବଂ 2.0-2.5 ର ପୃଥକତା ଡିଗ୍ରୀ ସହିତ |
ଆନିଅନ୍ ଏକ୍ସଚେଞ୍ଜ୍ ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡ଼ିକ ମୁଖ୍ୟତ an ଜ organic ବିକ ଏସିଡ୍ ଏବଂ ହାଲୋଜେନ୍ ଆୟନ ପରି ଆୟନିକ୍ ପଦାର୍ଥର ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ଉପଯୁକ୍ତ | ଶକ୍ତିଶାଳୀ କ୍ୟାସନ୍ ଏକ୍ସଚେଞ୍ଜ୍ ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡ଼ିକରେ ଅଧିକ ଆୟନ ବିନିମୟ କ୍ଷମତା ଏବଂ ଚୟନକର୍ତ୍ତା ଅଛି, ଏବଂ ଜଟିଳ ନମୁନାଗୁଡିକର ପୃଥକତା ଏବଂ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ଉପଯୁକ୍ତ |
ଉପରୋକ୍ତ ବିଷୟଟି କେବଳ ଲେଖକଙ୍କ ନିଜ ଅଭିଜ୍ଞତା ସହିତ ମିଳିତ ଅନେକ ସାଧାରଣ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭର ପ୍ରକାର ଏବଂ ପ୍ରୟୋଗ ପରିସରର ଏକ ପରିଚୟ | ପ୍ରକୃତ ପ୍ରୟୋଗଗୁଡ଼ିକରେ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ବିଶେଷ ପ୍ରକାରର କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ଅଛି, ଯେପରିକି ବଡ଼-ପୋର କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ସ୍ତମ୍ଭ, ଛୋଟ-ପୋର କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ସ୍ତମ୍ଭ, ଆଫିନିଟି କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭ, ମଲ୍ଟିମୋଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ସ୍ତମ୍ଭ, ଅଲ୍ଟ୍ରା-ଉଚ୍ଚ କ୍ଷମତା ସମ୍ପନ୍ନ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭ (UHPLC), ସୁପରକ୍ରିଟିକାଲ୍ ଫ୍ଲୁଇଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭ ( SFC), ଇତ୍ୟାଦି ସେମାନେ ବିଭିନ୍ନ କ୍ଷେତ୍ରରେ ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରନ୍ତି | ନମୁନାର ଗଠନ ଏବଂ ଗୁଣ, ପୃଥକତା ଆବଶ୍ୟକତା ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ ଅନୁଯାୟୀ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରକାରର କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ଚୟନ କରାଯିବା ଉଚିତ |
ପୋଷ୍ଟ ସମୟ: ଜୁନ୍ -14-2024 |